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                細胞β氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase)活性比色法
                時間:2022/2/16 點擊次數:1028

                   細胞β氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase)活性比色法定量檢測試劑盒

                產品說明書(中文版)

                 

                主要用途

                 

                   細胞β氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物PNP-NAG受到β氨基己糖苷酶催化水解后,在堿性環境下,呈現黃色,即采用比色法來測定樣品中酶活性*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種動物和人體細胞裂解懸液樣品中β氨基己糖苷酶的活性檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。

                 

                技術背景

                 

                β氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase;EC3.2.1.52.又稱為N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl--β-D-Glucosaminidase;NAGase)屬于含有20個糖苷水解酶(glycoside hydrolase)家族,也是肽聚糖水解酶,為溶酶體細胞器中的酶之一。其功能在于水解N-乙酰-β-D-氨基己糖苷中的末端N-乙酰-β-D-氨基己糖殘基(N-acetyl-D-hexosamine   residues),參與細胞內糖蛋白和糖脂的分解代謝,包括蛋白和中性糖脂中的寡糖、粘多糖等水解。具有宿主抗感染防御作用。β氨基己糖苷酶為同源二聚體結構,有αβ兩個亞體構成:HEXAHEXB。人體缺乏HEXAHEXB,將導致神經退行性相關的疾病,例如家族黑蒙性*?。?/span>Tay-Sachs?。┖?/span>神經節苷脂貯積病  Sandhoff )。 基于底物4-硝基苯基 N-乙酰-β-D-葡萄糖胺(4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosaminide;PNP-NAG),在β氨基己糖苷酶的作用下,水解釋放出硝基苯酚(p-nitrophenol)和N-乙酰-β-D-葡萄糖胺(N-acetyl-β-D-glucosamine;NAG,在堿性環境下,呈現出黃色,在分光光度儀下,產生吸光峰值變化405nm 波長),來定量分析β氨基己糖苷酶的活性。反應系統為:

                         

                產品內容

                 

                   緩沖液(Reagent A         毫升

                   反應液(Reagent B         毫升

                   堿性液(Reagent C         毫升

                   陰性液(Reagent D             微升

                   清理液(Reagent E         毫升

                   裂解液(Reagent F         毫升

                產品說明書           1

                 

                保存方式

                 

                保存   反應液(Reagent B在-20冰箱里,避免光照;其余的保存在4冰箱里,有效保證6

                 

                 

                用戶自備

                 

                1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器

                15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器

                細胞刮脫棒:用于細胞脫離

                (微型)臺式離心機:用于樣品操作

                比色皿或96孔板:用于比色分析的容器

                分光光度儀或酶標儀:用于比色分析


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